光吸收遵循的是比爾-朗伯定律(Beer–Lambert law),吸光度=吸光系數(shù)*吸收介質(zhì)的厚度*吸收介質(zhì)的濃度 即A=abc,其中A為吸光度,a為吸光系數(shù),b為厚度,c為樣品的濃度。影響吸光度的因數(shù)是b和c。a是與溶質(zhì)有關(guān)的一個(gè)常量。
同時(shí),因?yàn)閮x器都有一個(gè)測(cè)量上限,很多時(shí)候溶液都需要進(jìn)行稀釋。理論上如果都在測(cè)量范圍內(nèi),稀釋也沒有操作錯(cuò)誤,根據(jù)不同稀釋倍數(shù)測(cè)試出來的原液結(jié)果應(yīng)該都是一樣的。
當(dāng)一束光通過一個(gè)吸光物質(zhì)(通常為溶液)時(shí),溶質(zhì)吸收了光能,光的強(qiáng)度減弱。吸光度就是用來衡量光被吸收程度的一個(gè)物理量。吸光度用A表示。A=abc,其中a為吸光系數(shù),單位L/(g·cm),b為光在樣本中經(jīng)過的距離(通常為比色皿的厚度),單位cm,c為溶液濃度,單位g/L。A=Ecl。
濃度使吸光度變化的原理:
符號(hào)A,表示物質(zhì)對(duì)光的吸收程度。lg(I0/I1)式中I0是通過均勻的液體介質(zhì)的一束平行光的入射光的強(qiáng)度;It是透射光強(qiáng)度;T是透射比。A值越大,表示物質(zhì)對(duì)光的吸收越大。
根據(jù)比爾定律,吸光度與吸光物質(zhì)的量濃度c成正比,以A對(duì)c作圖,可得到光度分析的校準(zhǔn)曲線。在多組分體系中,如果各組分的吸光質(zhì)點(diǎn)彼此不發(fā)生作用,那么吸光度便等于各組分吸光度之和,這一規(guī)律稱吸光度的加和性。